Les Spider-Widows sont des araignées plus grosses que les Spiders, apparus dans l'extension Wrath of the Lamb.
On les retrouve dans tous les étages de l'extension, en particulier dans le Necropolis.
Les Spider-Widows sont plus résistants que les Spiders et lorsqu'on les tue, ils se divisent en 2 Spiders. Au contact, ils infligent un demi coeur de dégâts au total.